Contagem em placa

CROMOCEN CC

Usa a metodologia dos substratos tradicionais (lactose)

Usa a tecnologia dos substratos cromogênico (x-GAL) e fluorogênico (MUG)

Preparo dos meios de cultura (AVRB e CBVB)

Meio pronto para o uso

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Preparação de diluições decimais

Preparação de diluições decimais

Inoculação de 1 mL das diluições e adição de VRBA

Inoculação de até 0,5 mL das diluições por inundação em superfície em CC

Incubação a 35°C por 24 horas (CT)

                  a 44,5 °C por 24 horas (CF)

Incubação a 35°C por 24 horas

Leitura das placas

Leitura das placas – luz UV

Contagem simultânea de E. coli e coliformes em uma única placa

(E. coli é o indicador mais adequado de contaminação fecal)

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais  -  24 a 36 horas

Contagem de Coliformes totais ou de Coliformes fecais

Descarte das placas

Confirmação de coliformes totais e fecais em Caldo BVB

Incubação a 35°C por 24 a 48 horas

Leitura dos tubos

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais  - 96 horas

Autoclavagem das placas e tubos

Lavagem das placas e tubos

Secagem das placas e tubos

NMP

CROMOCEN CC

Usa a metodologia dos substratos tradicionais (lactose)

Usa a tecnologia dos substratos cromogênico (x-GAL) e fluorogênico (MUG)

Preparo do meios de cultura (Caldo Lauril Triptona (CLT), Caldo Bile Verde Brilhante (CBVB)

Meio pronto para o uso

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Diluição das amostras

Diluição das amostras

Inoculação dos tubos de CLT

Inoculação das placas

Incubação a 35 °C por 24 - 48 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

Leitura dos tubos

Leitura das placas – luz UV

Contagem simultânea de E. coli e coliformes em uma única placa

(E. coli é o indicador mais adequado de contaminação fecal)

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais  -  24 a 36 horas

Confirmação em CBVB

Descarte das placas

Incubação a 35°C por 24 a 48 horas

Leitura dos resultados

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais  - 120 horas

Autoclavagem da vidraria

Lavagem da vidraria

Secagem da vidraria

Petrifilm CC

CROMOCEN CC

Usa a metodologia dos substratos tradicionais (lactose)

Usa a tecnologia dos substratos cromogênico (x-GAL) e fluorogênico (MUG)

Meio pronto para o uso

Meio pronto para o uso

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Preparação de diluições decimais

Preparação de diluições decimais

Inoculação de 1 mL das diluições em Petrifilm CC

Inoculação de até  0,5 mL das diluições por inundação na superfície de CC

Incubação a 35°C por 24 horas (CT)

                  a 44,5°C por 24 horas (CF)

Incubação a 35°C por 24 horas (CT)

                   a 44,5°C por 24 horas (CF)

Leitura automática das placas

Leitura das placas – luz UV

Contagem simultânea de E. coli e coliformes em uma única placa

(E. coli é o indicador mais adequado de contaminação fecal)

Contagem de Coliformes totais ou de Coliformes fecais

Descarte das placas

Confirmação de CT ou CF em Caldo BVB

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais – 24 a 36horas

Incubação a 35 °C por 24 - 48 horas

Descarte das placas

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais - 72 horas

Presença/ausência

CROMOCEN SC

Usa a metodologia tradicional de pre enriquecimento, enriquecimento seletivo e isolamento nos meios seletivos diferenciais

Usa a metodologia tradicional de pre enriquecimento, enriquecimento seletivo e isolamento com identificação no

CromoCen SC baseado no emprego da fermentação de um álcool em combinação com um substrato cromogênico para a diferenciação de coliformes

Preparo dos meios de cultura (APT, RV, XLD, VB, LIA, URE)

Preparo dos meios de cultura (APT, RV)

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Pré enriquecimento  em APT

Pré enriquecimento em APT

Incubação a 35 °C por 24 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

Enriquecimento em RV

Enriquecimento em RV

Incubação a 42 °C por 24-48 horas

Incubação a 42 °C por 24-48 horas

Isolamento seletivo em XLD e VB

Isolamento em CromoCen SC

Incubação a 35 °C por 24 horas

Incubação a 35 °C por 24 horas

Leitura das placas

Leitura das placas e identificação

Provas bioquímicas (LIA, Urea)

Colônias suspeitas - sorologia

Incubação a 35 °C por 24 horas

Descarte das placas

Colônias suspeitas - sorologia

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais - 96 horas

Descarte das placas

Limitação: Não se detecta S. typhi, nem paratyphi

Lavagem das placas

Secagem das placas

Tempo total do ensaio e preparação dos materiais - 144 horas

Limitação: Não se detecta S. typhi, nem paratyphi

Presença/ausência

CROMOCEN ECCS

Usa a metodologia tradicional de enriquecimento seletivo e isolamento nos meios seletivos diferenciais

Usa a metodologia tradicional de enriquecimento seletivo e isolamento com identificação no CromoCen ECCS baseado no emprego da fermentação de sorbitol em combinação com substratos cromogênicos e fluorogênicos para a diferenciação de outros coliformes e uma prova rápida complementar

Preparo dos meios de cultura TSB +novobiocina, agar MacConkey sorbitol com telurito de potássio (SMAC + TP)

Preparo do meio de cultura - TSB +novobiocina

Tomada de amostras

Tomada de amostras

Enriquecimento em TSB +novobiocina

Enriquecimento em TSB +novobiocina

Incubação a 35 °C por 6-24 horas

Incubação a 35 °C por 6-24 horas

Isolamento seletivo em SMAC + TP

Isolamento em CromoCen ECCS

Incubação a 35 °C por 18-24 horas

Incubação a 35 °C por 18-24 horas

Leitura das placas

Leitura das placas e identificação

Colônias suspeitas – Indol e provas bioquímicas.

Colônias suspeitas – ressuspender as colônias em 0,2 mL de sol. salina e adicionar  o GAD para a prova rápida.

Incubação a 35 °C por 24 horas

Incubação a 35 °C por 1- 4 horas

E. coli - sorologia

GAD (+) - sorologia

Descarte das placas

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 52 horas

Lavagem das placas

Secagem das placas

Tempo total de ensaio e preparação dos meios - 96 horas

Limitações: o TP é muito seletivo, o que diminui a recuperação de E. coli O157:H7