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CROMOCEN
ECCS 
(Placas prontas para uso)

Meio cromogênico-fluorogênico produzido pela Biocen do Brasil para
o isolamento e identificação rápida de E. coli O157:H7, apropriado,
além disso, para a identificação e/ou contagem de coliformes y outras
bactérias Gram-negativas.
Em comparação com outras técnicas e meios convencionais, o CromoCen®
ECCS oferece ao laboratorista as seguintes vantagens:
Mais rápido. A identificação e/ou contagem dos microorganismos
coliformes, se realiza em um período máximo de 24 horas de
incubação; e de E. coli O157:H7 em no máximo de 28 horas. Também
para os microorganismos de interesse, se eliminam as provas bioquímicas
de identificação, em função de substratos específicos já incluídos
no meio.
Mais econômico. Com uma só placa, substituem-se vários
meios de cultura tradicionais, assim como as provas bioquímicas, além
de se economizar tempo e recursos em seu preparo e leitura de resultados.
Mais fácil de se utilizar. O meio é fornecido em placas
prontas para o uso eliminando o trabalhoso processo de preparação
dos meios em laboratório. A identificação ocorre por meio da diferenciação
das cores, fluorescência e da formação de halos, eliminando-se a necessidade
de investigação de um número significativo de colônias que não são
características.
Mais preciso. Sua exatidão diagnóstica é superior às
dos meios convencionais, destinados ao mesmo propósito.
Mais sensível. A presença de uma mistura especial de bases
nutritivas, permite altos níveis de recuperação para o isolamento
da E. coli O157:H7.
CromoCen® ECCS é sinônimo de qualidade pois além de seus atributos
e funcionalidade intrínsecos, seu desenvolvimento, produção e distribuição,
se baseiam em BPL, BPF e Normas ISO 9001:2000.
Características Técnicas do produto:
| Microorganismo |
Características das colônias
isoladas |
Provas adicionais rápidas |
Inoculação por inundação
de superfície |
Inoculação por estria |
| E. coli O157:H7 |
Verde-azuladas, bordas traslúcidas,
sem fluorescência* |
GAD (+) |
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| Coliformes (exceto E. coli
O157:H7) |
Violetas ou Verde-azuladas
com fluorescência azul
Diferentes tonalidades de violeta
Vermelhas com centro esverdeado ou violetas
com fluorescência amarela ou esverdeada
Azuis com ou sem halo azul |
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* Algumas cepas (Hafnia alvei, Pantoea
aglomerans) podem formar colônias verde azuladas, mas náo apresentam
fluorescência. Por isso se recomenda a realização da prova rápida
de GAD para eliminação de resultados falsos positivos.
O meio tem seu funcionamento baseado em uma complexa composição de
nutrientes que promovem um crescimento rápido e adequado dos microorganismos
de interesse, possuindo inibidores dos Gram-positivos.
A combinação de substratos cromogênicos e fluorogênicos para detectar
a atividade ß-galactosidase e ß-glucuronidase, conjuntamente com a
degradação do sorbitol, possibilita a identificação dos coliformes
e da E. coli O157:H7, diferenciando esta última, de outras
bactérias (Hafnia, Pantoea e Vibrionaceae e algumas espécies de Enterobacter)
também pelas provas rápidas de GAD e OXIDASE, executadas ao momento
da interpretação dos resultados para confirmar a identificação a partir
das colônias suspeitas (Verde-azuladas). A prova rápida de Indol pode
ser incluída em adição ou substituição ao ensaio de GAD.
Os coliformes podem ser presuntivamente identificados, como se relaciona
a seguir:
| Características das colônias
isoladas |
Inoculação por inundação
de superfície |
Inoculação por estria |
Identificação por fluorescência |
Microorganismo |
| Colônias violetas, mucoides,
com ou sem fluorescência amarela ou esverdeada |
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Klebsiella sp. |
| Colônias vermelhas com centro
esverdeado e fluorescência amarela |
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Enterobacter sp. |
| Colônias azuis com ou sem
halo azul |
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Pantoea agglomerans |
| Colônias de diferentes tonalidades
de violeta |
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Citrobacter sp. ou
Serratia sp. |
| Colônias verde-azuladas (GAD
-) |
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Hafnia alvei |
De maneira presuntiva, o meio possibilita a identificação de:
E. coli pelo surgimento de colônias de coloração violeta ou
verde azulado com fluorescência azul (em ocasiões, algumas cepas glucuronidase
tardias, poden requerer mais de 24 h para mostrar fluorescência e
um número muito reduzido pode não apresentar-la).
As espécies de Salmonela se distinguen pelo surgimento de colônias
vermelhas ou vermelhas com centro bege, bordas translúcidas com ou
sem fluorescência amarela (confirmar com sorologia direta para diferenciar
de uma possível confusão com Enterobacter).
Pseudomonas aeruginosa pode diferenciar-se, pelo surgimento de colônias
de cor rosa pálido, com fluorescência esverdeada.
| Características das colônias
isoladas |
Inoculação por inundação
de superfície |
Inoculação por estria |
Identificação por fluorescência |
Microorganismo |
| Colônias violetas ou verde-
azuladas, em sua maioria com fluorescência azul |
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E. coli |
| Colônias vermelhas ou vermelhas
com centro bege, bordas translúcidas com ou sem fluorescência
amarela e com ou sem precipitado biliar |
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Salmonela |
| Colônias rosa pálidas com
fluorescência esverdeada |
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Pseudomonas aeruginosa |
As colônias incolores ou com pigmentação própria, são características
de outras bactérias Gram-negativas.
Os organismos Gram-positivos são inibidos no meio.
Apresentaram elevada Sensibilidade (~ 98 %) e Especificidade (de 95
a 100 %) diagnóstica para os organismos de interesse em um intervalo
máximo de incubação de apenas 24 horas. O meio pode ser usado em diversos
segmentos da indústria de alimentos, cosméticos, produtos farmacêuticos
e biotecnológicos, entre outros.
A recuperação da E. coli O157:H7 no CromoCen® ECCS foi superior
à alcançada com o meio Mac Conkey com Sorbitol e ainda maior, com
os ensaios adicionais realizados no momento da leitura dos resultados
(Fig. 1).
Fig. 1 
Igualmente foram identificadas de maneira presuntiva, outras bactérias
Gram-negativas, com valores de Sensibilidade (de 89 a 100 %) e Especificidade
(de 95 a 100 %) superiores aos meios convencionais, permitindo a orientação
na posteriror identificação e confirmação dos isolamentos de interesse.
Tal é o caso da E. coli (colônias verde-azuladas ou violetas
em sua maioria com fluorescência azul), Salmonela (colônias de cor
vermelha com ou sem precipitado biliar) e algumas Shigella ß-glucuronidase
+ (colônias irregulares de cor verde-azulada e fluorescência azul),
identificadas principalmente em amostras de fezes.
Apresentação:
Pacotes contendo 10 placas de Petri de 90 x 15 mm com 16 mL de meio.
Indicações para a conservação e uso:
Mantenha o meio à temperatura de 4 a 120 C por um período de até 4
meses, protegido da luz. Abra o pacote no momento de usar as placas.
Observe que a superfície do meio não esteja úmida, senão secá-la por
trinta minutos, aberta, em fluxo laminar ou estufa higienizada.
Controle de qualidade:
pH: 7,0 ± 0,2
Cor e aparência do meio preparado: vermelho ligeiramente opaco.
Cepas recomendadas:
| Escherichia coli 0157:H7
ATCC 35150 |
(verde-azuladas, bordas translúcidas,
sem fluorescência) |
| Enterobacter aerogenes
ATCC 13048 |
(colônias vermelhas com centro
esverdeado e fluorescência amarela) |
| Citrobacter freundii ATCC
8090 |
(violeta) |
| Streptococcus faecalis
ATCC 29212 |
(inibido) |

E. coli O157:H7: verde-azulada, bordas translúcidas, sem
fluorescência

Salmonella typhimurium: vermelhas ou vermelhas com centro
bege, bordas translúcidas com ou sem fluorescência amarela


E. coli (excepto E. coli O157:H7): violetas ou verde
azuladas, com fluorescência azul
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